细胞免疫荧光注意事项？细胞免疫荧光步骤对大家来说一定是很陌生的，他是一种抗原抗体反应，好像对我们来说他显得很遥远的样子，因为我们并不了解他能做什么，通过这种技术可以让我们对抗原或抗体的性质、定位一次来分析出更多的数据。关于细胞免疫荧光注意事项以及细胞免疫荧光注意事项，免疫荧光操作流程，细胞免疫荧光和组织免疫荧光，细胞免疫荧光怎么做，细胞怎么做免疫荧光等问题，中华健康在线将为你整理以下的日常知识：

细胞免疫荧光注意事项

　　细胞免疫荧光步骤对大家来说一定是很陌生的，他是一种抗原抗体反应，好像对我们来说他显得很遥远的样子，因为我们并不了解他能做什么，通过这种技术可以让我们对抗原或抗体的性质、定位一次来分析出更多的数据。

　　那么细胞免疫荧光步骤是什么呢？

　　  步骤：

　　1.细胞一定要贴在玻片上（最好可以放入24孔板），为后面照像打基础。

　　细胞密度适中，大约60-75%满片即可，否则容易脱片。

　　2.取出细胞后用4%多聚甲醛固定15分钟，现用现配。

　　（以下各步骤切毋使玻片干燥）

　　3.PBS冲洗

　　4.0.1%Triton作用20分钟

　　5.PBS冲洗

　　6.10%正常血清封闭10分钟

　　7.加入一抗，4度孵育过夜（找个小瓶盖将小玻片支起来，抗体就不容易溢出），还要记住“砸片”，就是抗体从较高处落到片子上，以分布均匀。

　　抗体稀释度1：60，较常用！

　　8.PBS冲洗4次，各5分钟

　　9加入荧光二抗，室温30分钟。

　　抗体稀释度1：400，较常用！

　　10. 同8。

　　11.90%甘油封片。

　　也很关键阿，多封几次才有体会。

　　12.避光保存，或到显微镜下观察。

　　  细胞免疫荧光，这对很多人来说都是第一次听说这个东西，也不知道他对我们会有什么好处与坏处，科学研究就是这样子的，普通老百姓是不会明白其中的道理的，但是这些研究也是确实的在我们的生活中取得了成果，能够让大家过的更加舒适。

sigam dapi染料怎么用

　　使用方法：（仅供参考）

　　1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。

　　如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 DAPI 染色。

　　如果不需要进行其它染色，则直接进行 DAPI 染色。

　　2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。

　　对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。

　　 3， 室温染色 5-10 分钟。

　　4， 吸除 DAPI 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。

　　 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。

　　DAPI 溶液注意事项：

　　DAPI 被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。

　　 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。

　　荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。

　　 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂